Margen, Selman ja Pattyn edesmennyt täti. Kuoli jaksossa Selman valinta (Selma's Choice). Tämän jälkeen Gladys jakoi sukulaisilleen perintönsä aiemmin tehdyn videon avulla, jonka Lionel Hutz esitti perintötilaisuudessa. Margelle hän antoi perunalastukokoelmansa, Jacquelinelle Jub-Jub -iguaanin (Selma sai kuitenkin otuksen myöhemmin), ja Pattylle sekä Selmalle isoisän kaappikellon. Kuten kaikkien Bouviereiden, myös Gladyksen ääninäyttelijä oli Julie Kavner.